James Usshers bekanntestes Werk ist Annales veteris testamenti, a prima mundi origine deducti (Annalen des Alten Testaments, hergeleitet von den frühesten Anfängen der Welt).
In diesem Werk wird der Schöpfungszeitpunkt auf den 23. Oktober (Gregorianischer Kalender) respektive ca. 21. September (Julianischer Kalender) 4004 v. Chr. datiert. Die Bestimmung dieses Zeitpunktes geht offenbar auf John Lightfoot zurück.